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談?wù)劻馨图?xì)胞分離液使用操作步驟具體是什么？

淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離，也適用于大多數(shù)哺乳動物單個核細(xì)胞的分離。具有低毒、高得率、高純度等特點(diǎn)。

1、取新鮮抗凝全血或者去纖維蛋白血液，用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。

2、在離心管中加入適量分離液，將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方，注意保持兩液面界面清晰。

3、室溫，水平轉(zhuǎn)子500~1000g，離心20~30min。

4、離心后將出現(xiàn)明顯的分層：上層是稀釋的血漿層，中間是透明的分離液層，血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細(xì)胞層，離心管底部是紅細(xì)胞與粒細(xì)胞。

5、小心的吸取白膜層細(xì)胞到15mL潔凈的離心管中， 10mL PBS或細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞。250g，離心10min。

6、棄上清，5mL的PBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞，250g，離心10min。

7、重復(fù)步驟6；

8、棄上清，細(xì)胞重懸備用。
以上是關(guān)于淋巴細(xì)胞分離液的使用步驟介紹。

2021/06/08 15:49:02 4661 次

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